Inhalt

• Schreiten
• Teil 1 von 2: Überprüfung der Kalibrierung
• Teil 2 von 2: Berechnung der Ergebnisse

Eine Pipette ist eine Art Laborgerät, mit dem sehr kleine Flüssigkeitsmengen gemessen und übertragen werden. Genauigkeit und Präzision bei der Pipettenmessung sind erforderlich, da jede Abweichung der gelieferten Volumina die Ergebnisse eines Experiments beeinflussen kann. Um die Genauigkeit sicherzustellen, muss die Pipettenkalibrierung alle paar Monate überprüft werden. Der Kalibrierungsprozess hilft zu überprüfen, ob das Gerät die richtigen Volumina abgibt, damit es wiederhergestellt werden kann, wenn dies nicht der Fall ist.

Schreiten

Teil 1 von 2: Überprüfung der Kalibrierung

1. Sammeln Sie die notwendigen Materialien. Um die Kalibrierung einer Pipette zu überprüfen, benötigen Sie eine Pipette, Pipettenspitzen, destilliertes Wasser, ein Becherglas, ein Thermometer, eine Waage und Geschirr. Die Waage muss mikrogrammspezifisch sein, um Mikropipetten mit maximal 1 µl zu kalibrieren.
   • Sie benötigen nicht mehr als 5 ml Wasser. Füllen Sie die Tasse mit Wasser.
   • Stellen Sie sicher, dass die Pipettenspitzen richtig passen.
2. Messen Sie die Temperatur des destillierten Wassers. Stellen Sie das Thermometer ins Wasser und lassen Sie es mindestens eine Minute lang stehen. Wenn sich die rote Linie am Thermometer noch bewegt, lassen Sie sie noch eine Minute. Notieren Sie nach einer Minute die Temperatur in einem Notizbuch. Entfernen Sie das Thermometer und trocknen Sie es ab, wenn Sie fertig sind.
   • Die Wassertemperatur ist wichtig für die Berechnungen zur Überprüfung der Kalibrierung.
3. Stellen Sie die Waage auf die Waage und stellen Sie sie auf Null. Idealerweise verwenden Sie eine Waage mit Türen und einem isolierten Raum. Stellen Sie die Schüssel in den Raum und schließen Sie die Türen. Wenn keine Türen vorhanden sind, stellen Sie die Schüssel einfach auf die Waage. Drücken Sie die Taste "Null" oder "Tara" und warten Sie, bis die Waage Null anzeigt.
   • Wenn Sie die Waage auf Null setzen, wird das Gewicht der Plastikschale nicht berücksichtigt und es wird möglich, nur das Gewicht dessen zu messen, was Sie in die Schüssel geben.
4. Bereiten Sie die Pipette für die Kalibrierung vor. Wischen Sie die Pipette vor dem Start mit Ethanol ab, um Verunreinigungen abzutöten. Stellen Sie außerdem sicher, dass die Pipettenspitze nicht verstopft. Platzieren Sie die richtige Spitze am Ende und stellen Sie die Lautstärke ein, die Sie testen möchten.
   • Vor der Kalibrierung testen Sie sowohl das kleinste als auch das größte Volumen, das die Pipette abgeben kann.
5. Spülen Sie die Spitze vor dem Kalibrieren. Drücken Sie den Knopf bis zum ersten Anschlag hinein und setzen Sie die Spitze so in das destillierte Wasser ein, dass ca. 2 mm davon in die Flüssigkeit eingetaucht sind. Lassen Sie den Knopf los, um etwas Flüssigkeit aufzusaugen, und geben Sie die Flüssigkeit dann erneut ab, indem Sie den Knopf nach unten drücken. Wiederholen Sie diesen Vorgang dreimal, um die Spitze zu spülen.
   • Drücken Sie den Knopf bis zum zweiten Anschlag, um die in der Spitze verbleibende Flüssigkeit abzugeben und die Pipette aus dem Wasser zu entfernen.
6. Zeichnen Sie das Kalibrierungsvolumen auf. Drücken Sie den Knopf mit der Spitze aus der Flüssigkeit bis zum ersten Anschlag nach unten. Legen Sie etwa 2 mm von der Spitze entfernt in das destillierte Wasser und lassen Sie den Knopf los, um die Flüssigkeit in die Spitze zu ziehen. Warten Sie etwa eine Sekunde, bevor Sie die Spitze aus dem Wasser nehmen.
   • Stellen Sie sicher, dass die Spitze während des gesamten Aspirationsprozesses vollständig eingetaucht ist. Sie möchten keine Blasen in der Spitze, sonst stimmt das Ergebnis nicht.
7. Dosieren Sie die Flüssigkeit in der Schüssel auf der Waage. Legen Sie die Spitze gegen den Boden der Schüssel und drücken Sie den Knopf bis zum ersten Anschlag nach unten. Bewegen Sie sich an eine andere Stelle, etwas vom Wasser entfernt, und drücken Sie den Knopf bis zum zweiten Anschlag. Halten Sie den Knopf gedrückt und heben Sie die Spitze der Schüssel an.
   • Lassen Sie die Spitze auf der Pipette, da Sie sie erneut verwenden werden, um weitere Kalibrierungstests durchzuführen. Stellen Sie sicher, dass die Spitze nichts berührt.
8. Notieren Sie das Gewicht, das die Waage anzeigt. Schließen Sie die Tür, wenn Sie eine Waage in einem isolierten Raum verwenden. Warten Sie, bis sich die Werte nicht mehr ändern. Notieren Sie diesen Wert in Ihrem Notizbuch.
   • Es ist wichtig zu warten, bis sich die Zahl stabilisiert hat, bevor Sie sie aufschreiben. Ihre Messwerte werden falsch sein, wenn Sie nicht warten.
9. Wiederholen Sie diesen Vorgang, bis Sie mindestens 10 Messungen durchgeführt haben. Stellen Sie die Waage auf Null, spülen Sie die Spitze, ziehen Sie das gleiche Volumen auf, geben Sie das Volumen ab und notieren Sie das Gewicht. Sie benötigen mehrere Aufnahmen mit demselben Volumen und können dann den Durchschnitt aller Aufnahmen zusammen nehmen.
   • Sie können denselben Vorgang mit verschiedenen Volumes wiederholen, solange Sie mehrere Messungen pro Volume durchführen.

Teil 2 von 2: Berechnung der Ergebnisse

1. Verwenden Sie die Formel für das berechnete Volumen. Die Formel zur Berechnung des von der Pipette gelieferten Volumens lautet V = w * Z, wobei w das Gewicht des Wassers ist, Z der Umrechnungsfaktor basierend auf der Dichte des Wassers ist und V das berechnete Volumen der Wassermenge ist dort wird abgegeben.
   • Sie können die Z-Variable finden, indem Sie die Dichte des Wassers anhand der zu Beginn des Experiments aufgezeichneten Temperatur nachschlagen.
   • Beispiel: Wenn die Wassertemperatur 23 ° C betrug, nehmen Sie einen Z-Wert von 1,0035 µg / mg an.
2. Berechnen Sie den Mittelwert der wiederholten Versuche. Sie müssen das von der Pipette abgegebene Wasservolumen mindestens 10 Mal gewogen haben. Um den Mittelwert aller dieser Werte zu berechnen, addieren Sie sie und teilen Sie sie durch 10. Wenn Sie mehr oder weniger Versuche durchgeführt haben, addieren Sie jeden Versuch und dividieren Sie die Summe durch die Gesamtzahl der Versuche.
   • Beispiel: Die zehn Gewichte, die Sie für ein 10-µl-Pipettenvolumen registriert haben, lauten wie folgt: 9,89, 10,01, 10,02, 9,99, 9,95, 10,04, 9,96, 10,01, 9,99 und 9,98.
   • Der Mittelwert ist: (9,89 + 10,01 + 10,02 + 9,99 + 9,95 + 10,04 + 9,96 + 10,01 + 9,99 + 9,98) / 10 = 99, 84/10 = 9,984
3. Wenden Sie die Variablen auf die Gleichung an und lösen Sie sie. Sobald Sie die richtigen Werte für jede Variable ermittelt haben, können Sie diese in die Gleichung aufnehmen und nach dem berechneten Volumen auflösen. Um dies zu lösen, multiplizieren Sie einfach das Durchschnittsgewicht aller Testwerte mit dem Z-Wert.
   • Zum Beispiel: V = w * Z = 9,984 * 1,0035 = 10,019
4. Berechnen Sie die Genauigkeit der Pipette. Um die Genauigkeit zu berechnen, können Sie die Gleichung A = 100 x V verwenden._Durchschn/ V.₀ wobei A die Präzision der Pipette ist, V._Durchschn das mittlere berechnete Volumen und V.₀ Der Wert, den Sie für die Pipette eingestellt haben. Die Genauigkeit muss zwischen 99 und 101% liegen.
   • Wenn die Pipette richtig kalibriert ist, sollte der berechnete Wert sehr nahe an dem tatsächlichen Wert liegen, den Sie auf der Pipette eingestellt haben.
   • Zum Beispiel: A = 100 x V._Durchschn/ V.₀ = 100 x 10,019 / 10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
   • Diese Pipette ist richtig kalibriert.
5. Senden Sie die Pipette gegebenenfalls zur Kalibrierung ein. Wenn Ihre Pipette den Kalibrierungstest nicht besteht, verwenden Sie sie sofort nicht mehr für Experimente. Pipetten sind sehr empfindliche und teure Teile von Laborgeräten. Sie können die Kalibrierung nicht selbst reparieren, daher müssen Sie sie zur ordnungsgemäßen Wartung einsenden. Alternativ kommen einige Unternehmen in Ihr Labor und kalibrieren dort Ihre Pipetten.
   • Wenden Sie sich zur Wartung an das Unternehmen, das Ihre spezielle Pipettenmarke herstellt.